一、前言

　　2008 年 11 月欧盟（European Union）公布药品优良製造规范（GMP）附则1：无菌药品的製造之修订版，除了「冷冻乾燥小瓶铝盖压盖」之规定延至 2010年 3 月 1 日施行之外，其馀修订均在 2009 年 3 月 1 日生效。PIC/S 于 2009 年 1月 15 日公告相同内容的附则 1 新版本（PE 009-8 GMP 附则 1），并于公告同日生效。

　　与先前版本之重大差異为：

1. 洁淨室分级：重新定义洁淨室分级标准与监测要求。
   
2. 培养基充填允收标准：增加了对培养基允收标准的规定。这些标准引用自FDA 的无菌操作指导手册。进行「重大失败」调查时，应将最近一次成功的培养基充填以后生产的所有批次列入考虑。
   
3. 灭菌前的负荷菌：增加了应对每一个批次执行负荷菌（bioburden）之监测，包含经由无菌製造所生产的产品、以及最终灭菌的产品。如果最终灭菌产品採用过度灭菌的方法，其负荷菌含量分析只需在适当间隔执行。如为产品为參數放行（parametric release）时，应对每一个批次产品进行负荷菌含量分析，并且将之视为製程中试验。必要时，也应进行内毒素负荷（endotoxin burden）的量测。 [separator]
   
4. 对冷冻乾燥小瓶在最终压盖前之环境条件的指示：增加了冷冻乾燥产品小瓶直到橡皮塞完全塞入前需保持于 A 级条件下；且铝盖捲缩工程进行应在 A/B级环境，或该工作环境空气品质符合 A 级区要求。
   
   本次 PIC/S GMP 附则 1 修订与先前版本比较，不但考虑了当前的法规/规则，例如，EN ISO 14644 与 FDA 的无菌操作指导手册，而且也顾及国际调和化。另外，条文编号也大幅更易。
   
   二、重要内容变动介绍：
   
   （一）洁淨室分级与监测（Classification and Monitoring）
   
5. 阐明对「静态」与「动态」分级条件及对「动态」例行监测之期望。
6. 对洁淨室分级与监测要求进行区分（例如，关于取样容量/频率）
7. 等级類别（A-D 级）及取样容量/取样点/取样位置的要求，与 ISO14644一致化。
8. 对于 A 级区，规定对包括设备组装在内之关键操作，进行全程的微粒监测（亦即持续监测）；允许基于风险减少 B 级之抽样频率及 C/D 级之监测。
9. 提高 5 μm 微粒限量以反映取样方法极限（method limitations），使其与ISO14644 一致化。
10. 5 μm 微粒數是具有代表性的环境监测工具，应进行常规/連续计數（regular/consecutive counts）之调查。
11. 阐明在 A 级与 B 级条件中，对于自动微粒监测的期望，并须使用等向等速探针（isokinetic probes）。



（二）小瓶压盖（Vial Capping）


12. 以橡皮塞进行部分封塞的冷冻乾燥产品小瓶，直到橡皮塞完全塞入前需保持于 A 级条件下。
13. 小瓶铝盖压盖应在 A/B 级无菌区执行；或者在 A/B 级无菌区外，于 A级空气供应的洁淨环境下执行。
14. 小瓶铝盖捲缩设备（vial crimping equipment）为微粒來源，需于分隔的作业站（separate station）中操作。
15. 以橡皮塞封塞之无菌充填小瓶，应至铝盖捲缩工程完成后方属完整成品。
16. 压盖前，凡有缺漏/置换（missing/displace）橡皮塞的小瓶，均应以技术方法予以剔除，避免人为介入。
17. 引入在压盖过程使用 RABS（Restricted Access Barrier System）与隔離装置的概念。



（三）培养基充填（Media Fills）


18. 培养基充填要求与 FDA 的 2004 年无菌操作指导手册一致化。
19. 对于重大失败的调查，应该包含自上次成功培养基充填之后的所有製造批次。



（四）负荷菌监测（Bioburden Monitoring）


20. 最终灭菌与无菌过濾的每批次，须测试灭菌或过濾前之负荷菌量（pre-sterilization bioburden），使其与 1996 年欧盟指令（mandate）与稽查规范一致。
21. 使用过度灭菌法（overkill）时，允许「在适当间隔时间」进行监测。



三、相关的 Q&A：

　　对于 GMP 相关法规，欧洲药品管理局（European Medicines Agency, EMEA）蒐集有关问题，并经由 GMP/GDP 稽查员工作小组（GMP/GDP Inspectors Working Group）讨論，将各问题的答覆公佈于网站上。

　　EMEA 是欧盟下属的机构，主要负责药品的评估与监督，以保护及促进公众健康。下列提问皆与 GMP 附则 1 相关。

　　GMP Q&A 网址：http://www.emea.europa.eu/Inspections/GMPfaq.html。

问：如何证明灭菌过濾器（sterilising filters）的完整性？

答： 在 GMP 附则 1 第 85 条（也是 PIC/S PE 009-7 GMP 附则 1 第 85 条）指出：「灭菌过濾器的完整性在使用之前应经证明，且在使用后应立即以适当方法，例如起泡点（bubble point）、扩散性流动（diffusive flow）或压力保持试验（pressure hold test）确认之。」

　　过濾器的灭菌过程，会对过濾器产生物理性压迫（physically stressful）。譬如，灭菌过程中的高温，可能会引起过濾器扭曲（distort），可能导致大于0.2 μm 尺寸的粒子通过过濾器的流体路径。过濾器的性能会因使用而改变，当粒子开始阻塞个别路径时，会使原可容许通过之小粒子便无法顺利通过。基于上述理由，应在过濾器灭菌之后及使用之前，执行其完整性测试，使用之后也要再度测试。此外，完整性测试应在厂内操作设备上原位（in-situ）执行，以便证实連同其框架之整套过濾器的完整性。

问： 当最终灭菌的最终产品批次（finished product batch），是由一个以上灭菌器的装载（more than one steriliser load）所组成时，其无菌测试的抽样要求为何？

答： 对于无菌测试的抽样计划，应考虑如同 GMP 指引术语彙编中之批次（batch）的定义，連同 GMP 附则 1 第 93 条（也是 PIC/S PE 009-7 GMP 附则 1 第 93条）【2008 年 2 月修订版 GMP 附则 1 第 127 条（也是新版 PIC/S PE 009-8 GMP附则 1 第 127 条）】中所陈述的建议。

　　每一个灭菌器的装载视为独立的次批次（sub-batch），因此，每个次批次应执行其无菌试验。每一个灭菌器装载的试验样品數目，应遵从欧洲药典第2.6.1.-3.条注的要求。

问：对于上面的规定是否可有任何例外？

答： 大容量注射剂，其灭菌週期已以过度灭菌法进行验证者，可以接受依照由主管机关（supervisory authority）同意之内部特定取样计画替代之（除非已规定于上市许可中）。该内部取样计画应详述如何从每一个灭菌器装载抽取样品，且必须包含灭菌器验证中的冷点在内。每一个装载抽取的样品數，应根据以风险为基础的方法进行界定，且每批总样品數，应遵从欧洲药典 2.6.1.-3.条的要求。

注：欧洲药典第六版 Table 2.6.1.-3. – Minimum number of items to be tested


Number of items in the batch	Minimum number of items to be tested for each medium, unless otherwise justified and authorised*
Parenteral preparations - Not more than 100 containers - More than 100 but not more than 500 containers - More than 500 containers	10 percent or 4 containers, whichever is the greater 10 containers 2 percent or 20 containers, whichever is less
Ophthalmic and other non-injectable preparations - Not more than 200 containers	5 percent or 2 containers, whichever is the greater
- More than 200 containers - If the product is presented in the form of single-dose containers, apply the scheme shown above for preparations for parenteral use	10 containers
Catgut and other surgical sutures for veterinary use	2 percent or 5 packages whichever is the greater, up to a maximum total of 20 packages
Bulk solid products - Up to 4 containers - More than 4 containers but not more than 50 containers - More than 50 containers	Each container 20 percent or 4 containers, whichever is the greater 2 percent or 10 containers, whichever is the greater
Pharmacy bulk packages of antibiotics (greater than 5 g)	6 containers
* If the contents of one container are enough to inoculate the two media, this column gives the number of containers needed for both the media together.





資料來源：

1.     International  Pharmaceutical  Quality  (http://www.IPQpubs.com)  Vol.3  No.1

JANUARY/FEBRUARY 2009。

2.     PIC/S PE 009-8 (Annexes), 15 January 2009。

3.     EMEA 網站 GMP Q&A。

4.     歐洲藥典第六版。